1. Pridanie vzoriek: Pridajte riedenie vzorky na potiahnutú platňu, zrieďte sérum v PBS alebo fyziologickom roztoku v pomere 1:20 a potom pridajte 10 ul do reakčných jamiek mikroplatničky.
2. Kontrolný prídavok: 3-jamková negatívna kontrola, 1-jamková pozitívna kontrola a 100 ul kontrolného séra.
3. Inkubácia: Pretrepte reakčnú doštičku, aby sa vzorka dobre premiešala a potom ju umiestnite do inkubátora s teplotou 37 °C alebo vodného kúpeľa na 20 minút.
4. Umývanie podláh: Zrieďte 15 ml čistiaceho roztoku na 300 ml destilovanou vodou. Pri ručnom umývaní by sa mal obsah vzduchu reakčnej dosky vyliať a umiestniť do otvoru naplneného umývacou kvapalinou a potom stáť 30 °C, aby sa prudko pretrepal. Túto operáciu zopakujte 5-krát a vyšľahajte dosucha. Zariadenie potrebuje vykonať 5-krát. 200 ul premývacieho roztoku možno vstreknúť do každej jamky alebo naplniť, potom nechať 30 minút pôsobiť a osušiť.
5. Pridanie pracovného roztoku označeného enzýmom: Do každej jamky v inkubátore s teplotou 37 °C pridajte 100 ul pracovného roztoku označeného enzýmom a po 20 minútach päťkrát premyte platňu. Umývacia doska je rovnaká ako v kroku 4.
6. Toto je posledný krok reakcie s vývojom farby a ukončením reakcie: do reakčnej jamky sa pridá 50 ul substrátu a farba sa vyvíja počas 10 minút v tme pri 37 °C. Roztok v každej jamke sa zastaví a premiešajte na ukončenie reakcie. Použitie mikrodoštičiek sa musí vykonávať za sterilných podmienok. Po použití platničky dôkladne vydezinfikujte a vyčistite, no pamätajte na to, že pri niektorých platniach je potrebné pozorne si prečítať návod, či ich možno sterilizovať pri vysokých teplotách.