Všeobecne povedané, v dôsledku zložitého zloženia krvi mnohé látky, najmä plazma alebo sérum vyšších zvierat, majú silný interferenčný účinok na reakciu medzi činidlom TAL (LAL) a endotoxínom. Preto, keď testujeme endotoxín takýchto vzoriek, musíme pred testovaním odstrániť rušivé látky.
V súčasnosti medzi interferujúce látky v plazme patria najmä rôzne inhibítory proteáz, proteíny viažuce endotoxín a inhibítory plazminogénu. Pre kolorimetriu môže faktor Xa rozkladať Boc-LEU-Gly-Arg-PNA peptidový reťazec. Preto je potrebné pred stanovením tieto rušivé látky eliminovať.
Metódy predbežnej úpravy na odstránenie rušivých látok z krvi sú nasledovné:
(1) Metóda riediaceho zahrievania: plazma sa zriedi 3 až 10-krát rozpustenou vodou a potom sa zahrieva vo vode s teplotou 37 až 100 ° C. Doba výdrže je vo všeobecnosti 5 ~ 10 minút;
(2) Metóda extrakcie chloroformom: pridajte rovnaké množstvo chloroformu do plazmy a vibrujte 3 hodiny, potom odoberte hornú vrstvu na detekciu;
(3) Metóda úpravy éterom: pridajte éter do plazmy na úpravu a odstráňte éter pri 40 °C;
(4) Metóda kyseliny trifluóroctovej: pridajte kyselinu octovú do plazmy na úpravu pH na 4,0 a potom použite K2HPO4 na úpravu pH na 7~7,5;
(5) Metóda úpravy povrchovo aktívnou látkou: rovnako ako metóda riediaceho zahrievania sa iba riediaca voda mení na povrchovo aktívnu látku;
(6) Gélová filtrácia;
(7) Alkalická metóda úpravy: plazma sa udržiavala pri 0,2 NNaOH 37 °C počas 10 minút a potom sa neutralizovala HCl;
(8) Metóda kyseliny chloristej (PCA) alebo nová metóda kyseliny chloristej (New PCA);
(9) Metóda guľôčok: vložte do plazmy špeciálnu živicu absorbujúcu endotoxín, vyberte ju a pridajte činidlo LAL na reakciu.
Spomedzi týchto metód sú bežne používanými metódami metóda extrakcie chloroformom, metóda riediaceho zahrievania, metóda kyseliny chloristej (PCA) a metóda novej kyseliny chloristej (New PCA). Prvé dve metódy je potrebné prediskutovať počas stanovenia kvôli existencii miery obnovy endotoxínu, falošne pozitívnym výsledkom a iným problémom. Metóda PCA (New PCA method) sa vzhľadom na dobrú rýchlosť regenerácie pridaného endotoxínu v súčasnosti používa najmä v predklinickej liečbe v Japonsku.