1. Pri stanovení endotoxínu v krvi venujte pozornosť výberu metód a činidiel.

2. Príprava plazmy alebo séra

Ako bežná klinická vzorka je hlavnou vzorkou plazma a jej miera využitia je viac ako 95 %. Preto je veľmi dôležité pripraviť plazmu ako hlavnú súčasť telesnej tekutiny. Podľa Dasa je endotoxín vo všeobecnosti viazaný na krvné doštičky okrem svojho voľného stavu, preto je vhodnejšie použiť ako vzorku plazmu obsahujúcu veľké množstvo krvných doštičiek. Pri príprave ľudskej plazmy alebo zvieracej plazmy sa v súčasnosti, aby sa predišlo poškodeniu buniek, v zahraničí väčšinou používa nízkoteplotná separácia s použitím vzoriek plazmy s veľkým počtom krvných doštičiek, to znamená pri podmienkach separácie 4 ℃ 1000gx10 minút, alebo 3000gx40 sekundové separačné podmienky, keď nie je k dispozícii nízkoteplotná odstredivka. Za normálnych teplôt nie je dovolené vykonávať vysokorýchlostnú a dlhodobú separáciu. Okrem toho sa pri separácii plazmy alebo séra treba vyhnúť bakteriálnej kontaminácii.

Príprava séra: Na odber krvi použite injekčnú striekačku bez antikoagulancia a preneste ju do centrifugačnej skúmavky a umiestnite ju do ľadového vodného kúpeľa na 30 minút pri 4 °C, 1000xg, 10 minút na centrifugáciu.

Po oddelení plazmy alebo séra, ak sa dočasne nepoužíva, môže byť zmrazené na - 80 ℃ a použité do 1 mesiaca. Poznámka Aby ste sa vyhli adsorpcii endotoxínu, použite na skladovanie sklenenú skúmavku.

3. Druhy a účinky antikoagulancií

Pri príprave plazmy v dôsledku pridávania určitých antikoagulancií má typ a množstvo antikoagulancií veľký vplyv na rýchlosť regenerácie. Vo všeobecnosti bežne používané antikoagulanciá zahŕňajú hlavne heparín, citrát sodný a EDTA, z ktorých je najrozšírenejší heparín. Vieme však, že veľké množstvo heparínu bude interferovať s endotoxínovou reakciou, najmä pri metóde riediaceho zahrievania a metóde extrakcie chloroformom, čo zníži rýchlosť regenerácie, ale má menší vplyv na metódu PCA, takže množstvo pridaného heparínu a uvoľňuje sa pri príprave plazmy stačí 2~5 μ L/ml.